2021届高考一轮复习第十二单元物技术实践训练卷 B卷

2021届单元训练卷·高三·生物卷（B）
第十二单元 生物技术实践

注意事项：
1．答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。
2．选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
3．非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
4．考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。

一、选择题(本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一个选项符合题目要求。)
1．下列关于果酒、果醋酿造实验的说法错误的是
A．乙醇可以作为果醋发酵的底物
B．酵母菌和醋酸杆菌增殖方式相同
C．酵母菌和醋酸杆菌同化作用类型相同
D．果酒发酵产物中的乙醇可以抑制杂菌生长
2．下列关于以酵母菌为材料进行实验的叙述，正确的是
A．探究酵母菌的呼吸方式，可根据是否产生CO2来判断
B．探究酵母菌种群数量变化，应设置空白对照排除无关变量影响
C．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用不只是作为反应底物
D．用酵母菌发酵制作果酒，选择溴麝香草酚蓝水溶液检测产生的酒精
3．某同学用泡菜坛（如图）进行果酒发酵，相关叙述错误的是

A．水槽加水并扣上坛盖，可隔绝空气，防止微生物入侵
B．果酒发酵过程产生的CO2可通过水槽以气泡形式排出
C．若观察到瓶中有白色浑浊物漂浮，则可能被杂菌污染
D．用酸性重铬酸钾溶液可测定发酵液中的酒精浓度
4．下列有关腐乳制作的叙述，错误的是
A．制作腐乳时，始终以毛霉发挥作用为主
B．毛霉生长的适宜温度约为15~18℃
C．后期发酵时间长短与盐用量、卤汤成分等有关
D．封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰
5．将总状毛霉、米根霉及两者等量混合接种于豆腐白坯，测定腐乳发酵过程中可溶性蛋白质含量的变化如图所示，其中P1时豆腐呈白坯，P2时豆腐呈毛坯，P3表示加盐8天后，R1~R9表示密封腌制后第10天至第90天。下列有关叙述正确的是

A．应在严格无菌条件下分别接种等量的菌种
B．食盐会抑制蛋白酶活性导致可溶性蛋白下降
C．霉菌菌丝生长旺盛时伴随蛋白酶活性显著升高
D．在后期发酵过程中有关蛋白酶活性会持续升高
6．下列有关微生物培养与分离的操作叙述中正确的是
A．G6玻璃砂漏斗用完后用0.1mol/L HCl浸泡，并抽滤去酸
B．在将培养基转移到三角瓶和试管时使用取样器
C．在超净台操作时需打开紫外灯和过滤风
D．玻璃刮刀在涂布前后都要进行灼烧处理
7．某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，正确的是
A．分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的
B．接种时应单手打开皿盖，然后取出浸泡的玻璃刮刀直接涂布
C．本实验采用涂布分离法接种，可能导致实验结果偏小
D．若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板
8．研究人员为了分离得到厌氧固氮菌，进行了下列实验操作步骤：①将土样稀释涂布到不含氮的选择培养基平板上，放置于厌氧培养罐中。②培养一段时间后，在平板上长出了菌落。③用“影印法”将上一步平板中的细菌复制到两组缺氮的选择培养基平板上，分别置于厌氧培养罐内、外保温培养。相关叙述不正确的是
A．步骤①和步骤③利用厌氧培养罐培养细菌时，需保留氮气
B．步骤②平板上生长出的细菌是厌氧固氮菌或兼性厌氧固氮菌
C．在厌氧培养罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌
D．在厌氧培养罐外的平板上生长、厌氧培养罐内的平板上不生长的为厌氧固氮菌
9．下列有关加酶洗衣粉的叙述，正确的是
A．水温越高加酶洗衣粉的洗涤效果越好
B．为避免相互干扰，洗衣粉中只适宜添加一种酶制剂
C．使用加酶洗衣粉，可降低生活污水中P元素的含量
D．洗衣粉中酶主要是通过快速分解溶在水里的污渍发挥作用
10．已知血渍的主要成分有蛋白质、脂质等，某研发中心在研制加酶洗衣粉的过程中，检测不同浓度的脂肪酶溶液对血渍中脂质类物质的去污效果，结果如下图。有关叙述错误的是

A．为排除温度对实验的影响，需保持各组实验温度相同且适宜
B．脂肪酶能通过降低活化能和为反应供能来提高化学反应速率
C．选用酶浓度为250mg·100mL−1的脂肪酶溶液可节约生产成本
D．洗涤沾染血渍的棉织物时，添加适量纤维素酶可提高去污效果
11．人类利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。下列关于果酒、果醋制作原理的叙述正确的是
A．在葡萄酒自然发酵的过程中，起主要作用的是野生型酵母菌
B．变酸的酒表面的菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的
C．在缺氧、呈酸性的发酵液中，醋酸菌能大量生长繁殖
D．在酸性条件下，溴麝香草酚蓝水溶液与酒精反应呈现灰绿色
12．果汁生产过程中，常出现具有致畸性的展青霉素。研究表明，酵母菌对展青霉素有吸附作用。下图为利用固定化失活酵母菌去除展青霉素的实验结果。下列有关叙述错误的是

A．须将干酵母活化培养扩增后再进行灭活
B．利用固定化活酵母更利于去除展青霉素且保持果汁品质
C．在果汁中添加固定化失活酵母的适宜剂量是16.7g·L−1
D．在果汁中直接添加失活酵母，会因不易分离而难以去除展青霉素
13．下列有关生物技术实践的叙述，错误的是
A．对培养基灭菌只能杀死除目的菌株之外的所有微生物
B．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒
C．可通过闻或品尝的方法检测发酵液中是否有酒精
D．制备固定化酵母时，凝胶珠需在CaCl2溶液中处理一定时间
14．酸奶是以牛奶为原料，经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌（发酵剂），经发酵后，再冷却灌装的一种牛奶制品。关于酸奶制作，下列说法正确的是
A．发酵菌种是乳酸菌，它能更高效地利用抗生素的牛奶
B．制作酸奶需要的时间与温度有关
C．牛奶变酸是因为牛奶中的蛋白质被乳酸菌利用形成了乳酸
D．所有物质都装瓶后再加热灭菌，酸奶凝固的会更好
15．下图所示的酶固定化技术中属于包埋法的是

A．①② B．③④ C．①④ D．②③
16．下列有关利用不同材料进行“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是
A．鸡血细胞液中，加入0.4mol/L的NaCl溶液有利于瓦解细胞膜
B．洋葱鳞片叶碎片中，加入沐浴液和食盐后研磨有利于去除细胞壁
C．鱼白（精巢）提取的DNA滤液中，加入嫩肉粉有利于去除蛋白质
D．菜花提取的DNA滤液中，加入冷酒精有利于溶解DNA
17．下图为利用鸡血进行DNA粗提取的部分操作。其正确的操作顺序为

A．①②③④ B．①④②③ C．③①④② D．③④①②
18．作为萃取胡萝卜素的有机溶剂，哪一项不符合实验要求
A．能充分溶解色素 B．与水混溶
C．对人无毒 D．易与产品分离
19．果酒制作过程中利用酵母菌发酵产生酒精，如图为酒精发酵过程中酵母菌数量随时间的变化情况，下列相关叙述错误的是

A．为获得纯净的酵母菌菌种，应对培养液进行干热灭菌或高压蒸汽灭菌
B．稳定期酵母菌酒精发酵的反应式是
C．对该菌种长久保藏时应选择对数生长期的菌种采用甘油管藏法进行保存
D．衰亡期时采用血细胞计数板法所统计的数值较图中实际活菌计数值要高
20．下列关于生物技术在生活中应用的说法，错误的是
A．利用发酵技术，在鲜奶中加入乳酸菌可制成酸奶
B．制作泡菜的坛子加水密封是为了抑制乳酸菌繁殖
C．制葡萄酒时，要将温度控制在18～25℃
D．变酸果酒表面的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的
21．黑腐皮壳菌（一种真菌）感染苹果植株可引发腐烂病。现科研人员对该菌进行分离培养，下表是分离培养时所用的培养基配方，下列相关叙述错误的是
物质
马铃薯
葡萄糖
自来水
氯霉素
琼脂
含量
200g
20g
1000mL
0.3g
20g
A．培养基中加入氯霉素的作用是抑制细菌等杂菌的生长繁殖
B．马铃薯可为微生物生长提供无机盐、碳源、氮源等营养成分
C．制备该固体培养基的步骤：计算、称量、溶化、灭菌、调pH、倒平板
D．对该菌进行培养并计数时，应用稀释涂布平板法将菌液接种到培养基上
22．提取与鉴定蚕豆组织细胞DNA的相关实验操作中，不影响最终获得DNA总量的是
A．蚕豆组织的类型和质量 B．向DNA的溶液中加入蒸馏水量
C．玻璃棒搅拌的方向和力度 D．加入二苯胺试剂的量
23．对于玫瑰精油的提取装置，说法正确的是

A．图中②为进水口，③为出水口
B．收集后的液体中要加入NaCl，促使水油分离
C．本装置为萃取装置
D．使用该装置时，由于原料在水中，不易产生原料焦糊问题
24．有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少种类对人、畜的毒性很强。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物，下列做法错误的是
A．在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在添加有机磷农药的培养基上培养以获取相应的微生物
B．在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格
C．若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计
D．制备固体培养基时加入的常用凝固剂是琼脂；若培养基需要调节pH，则应在灭菌之后调节。
25．菌种M和菌种N在发酵工程应用上具有不同的优越性，为了获得具有它们共同优良性状的融合菌，进行了下图所示的实验。已知菌种M为组氨酸依赖（组氨酸合成相关基因突变为B-），菌种N为色氨酸依赖（色氨酸合成相关基因突变为A-），下列分析错误的是

A．菌种M和N可通过人工诱变和选择性培养筛选获得
B．用PEG诱导融合之前需要去除菌种M和N的细胞壁
C．在培养基X中添加组氨酸和色氨酸以筛选出杂种融合菌
D．从培养基X中分离出的杂种融合菌P对两种氨基酸均不依赖
二、非选择题（本题包括5小题，共50分）
26．（10分）回答下列《生物技术实践》有关问题：
（1）高压蒸汽灭菌锅灭菌，开始加热时要打开排气阀、关闭安全阀，其目的是为了_________，以避免锅内达不到预设的温度或压力。
（2）葡萄酒呈现深红色的原因是_________。发酵完成后，将发酵液用_________过滤，除去葡萄皮和籽；酿果酒时，加蔗糖是为了_________。
（3）在制作泡菜测定亚硝酸盐含量时，显色剂是由10g/L的对氨基苯磺酸和1g/L的N-1-萘基乙二胺_________混合而成，泡菜打成匀浆前，_________（填不需要/需要）用清水冲洗；泡菜腌制过程中若泡菜坛有砂眼，常导致腌制的蔬菜臭而不酸，其原因可能是_________条件下乳酸菌不发酵，而其它杂菌繁殖后导致蔬菜腐败发臭。泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_________等（写出两点）。
27．（10分）脂肪酶能将白色的乳化油脂分解为甘油和脂肪酸（无色），微生物已经成为脂肪酶工业生产的主要来源。某研究小组欲用产脂肪酶的某种芽孢杆菌为材料进行诱变，筛选出脂肪酶高产菌株。请回答下列问题：
（1）土壤有“微生物的天然培养基”之称，你应该采集___________环境的土样，以获得原始菌种；为增加菌种数量可以进行___________，且培养基应中加入一定量的___________。
（2）原始菌株经诱变后，采用___________法将菌液接种在添加了乳化油脂固体培养基上进行培养并获得单细胞菌落，通过比较___________筛选出脂肪酶高产菌株。
（3）高纯度的酶能显著提高催化效率，脂肪酶的化学本质是蛋白质，实验室常采用___________法分离纯化脂肪酶，此方法分离蛋白质时，相对分子质量___________的蛋白质先从色谱柱中洗脱出来；还可以根据脂肪酶和其他蛋白质分子的___________等差异，在电场中产生不同的迁移速度，从而分离脂肪酶。
28．（10分）生物技术的广泛应用，给社会带来了较大的经济效益，受到社会的广泛关注。在应用生物技术时，我们通常需要对相应的生物或成分进行分离、纯化及鉴定。
（1）要分离、纯化大肠杆菌，需要在固体培养基表面接种大肠杆菌，最常用的接种方法是____________。若要鉴定大肠杆菌可用____________培养基。
（2）为确定得到的是纤维素分解菌，在染色法鉴定后，还需要进行发酵产____________的实验，测定该发酵产物的方法一般是____________。
（3）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰油中，要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是水蒸气蒸馏法，该方法的原理是________________________。
（4）萃取胡萝卜素装置中，采取水浴加热的原因是____________，在加热瓶口安装冷凝装置的目的是____________。
（5）从生物材料中得到蛋白质提取液中往往含有一些无机盐类的小分子，可以用____________（填“盐析”或“透析”）的方法去除这些小分子，该方法____________（填“”或“不能”）彻底分离不同大小的蛋白质。
29．（10分）某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。请回答下列问题：

（1）土壤悬液首先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出_______________。
（2）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行______________，然后涂布在含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到______________，其周围出现透明水解圈，______________比值大小与该菌所产植酸酶数量多少、活性强弱相关。
（3）筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养，培养时需要振荡，其主要目的是______________。
（4）常用固定化植酸酶处理饲料，其主要优点有________________________和可连续处理等。在建立和优化固定化植酸酶处理工艺时，除考虑_________________________、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有固定化的方法和固定化________________。
30．（10分）果汁类饮料是广受消费者喜爱的一类饮品。早期生产出来的果汁总存在浑浊、沉淀等现象，出汁率也较低，这是因为植物细胞壁在生产过程中不易除去。后来，人们逐渐找到了改进的一些方法，如使用果胶酶处理果汁，不但能使其变得澄清，同时还能提高出汁率。请利用有关知识，回答下列问题：
（1）果胶酶并不特指某一种酶，它包括了________________________________和果胶分解酶等。能产生果胶酶的生物种类除了植物、细菌，还_________________等（举2例）。
（2）如果要通过培养细菌来生产果胶酶，则需对目的细菌进行筛选。实验室中筛选微生物的原理是：________________________________________________________________。筛选培养时，要将目的细菌添加到预先配制好的选择培养基中，这一过程称为____________。
（3）为方便产物与酶的分离，提高产品质量；同时实现对酶的反复利用，节约生产成本，我们可以采用_______________________的方式来生产果汁。20世纪70年代，在这一技术的基础上，人们又发展出了固定化细胞技术。请对固定化细胞技术相对于前一技术的优点和缺点各举一例：
优点：______________________________________________；
缺点：______________________________________________。



答 案
1．【答案】B
【解析】乙醇在有氧条件下可被醋酸菌氧化为醋酸，A正确；酵母菌的增殖方式为出芽生殖，而醋酸杆菌的增殖方式为二分裂，B错误；酵母菌和醋酸菌的同化作用类型都为异养型，C正确；果酒发酵产生的乙醇可以抑制其他微生物的生长，D正确。
2．【答案】C
【解析】酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸的产物都有CO2生成，不能根据CO2的产生来判断其呼吸方式，A错误；探究酵母菌种群数量变化实验中无空白对照，该实验形成了前后自身对照，B错误；利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用不只是作为反应底物，还为酵母菌提供营养，C正确；酵母菌发酵产生的酒精可用酸性重铬酸钾检测，D错误。
3．【答案】D
【解析】乳酸菌为厌氧菌，在水槽加水并扣上坛盖，可隔绝空气，防止微生物入侵，A正确；果酒发酵过程酵母菌无氧呼吸产生的CO2可通过水槽以气泡形式排出，B正确；发酵过程中若观察到瓶中有白色浑浊物漂浮，则可能被杂菌污染，C正确；乳酸菌无氧呼吸的产物是乳酸，不产生酒精，D错误。
4．【答案】A
【解析】制作腐乳时，并非一直以毛霉发挥作用为主，如发酵后期，A错误；腐乳制作的菌种主要是毛霉，毛霉生长的适宜温度约为15~18℃，B正确；制作腐乳过程中，后期发酵时间长短与盐用量、卤汤成分等有关，C正确；为了防止杂菌污染，封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰，D正确。
5．【答案】A
【解析】本题主要考查腐乳的制作原理及影响因素，要求学生有一定的识图能力及分析推理能力。将总状毛霉、米根霉及两者等量混合接种于豆腐白坯，应在严格无菌条件下分别接种等量的菌种，A正确；P3表示加盐8天后，从图中可以看出，加盐后可溶性蛋白含量上升，B错误；霉菌菌丝生长旺盛时蛋白酶的量增多，蛋白酶活性不会显著升高，C错误；随着底物的消耗和产物的生成，在后期发酵过程中有关蛋白酶活性不会持续升高，D错误。
6．【答案】D
【解析】G6玻璃砂漏斗用完后用1mol/L HCl浸泡，并抽滤去酸，再用蒸馏水冲洗至中性，干燥保存，A错误；将培养基转移到三角瓶和试管时必须使用三角漏斗，B错误；在超净台操作时需要关闭紫外灯，C错误；玻璃刮刀在涂布前后都要进行灼烧灭菌，D正确。
7．【答案】C
【解析】分解尿素的细菌是异养型，不能以CO2作为碳源，A错误；接种时单手打开皿盖，然后用涂布器将菌液均匀的涂布在培养基表面，B错误；统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，C正确；在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落。若空白对照组出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用，D错误。
8．【答案】D
【解析】步骤①和步骤③要筛选出固氮菌，培养基应不含氮，但培养罐中需保留氮气，A正确； 步骤②在厌氧培养罐中生长出的细菌，可能是厌氧固氮菌，也可能是兼性厌氧固氮菌，B正确；在厌氧培养罐内外均能生长，说明既能进行有氧呼吸又能进行无氧呼吸，为兼性厌氧固氮菌，C正确；在厌氧培养罐外不生长、厌氧培养罐内能生长，说明只进行无氧呼吸，为厌氧固氮菌，D不正确。
9．【答案】C
【解析】A．酶的活性受温度影响，适宜温度的水温条件下酶洗衣粉的洗涤效果越好，A错误；B．酶具有专一性，不同的酶催化不同的物质水解，因此为了去除多种污渍，洗衣粉中一般会添加多种酶制剂，B错误；C．与普通的洗衣粉相比，用加酶洗衣粉可以减少P对河流的污染，C正确；D．加酶洗衣粉中的酶主要是通过快速分解衣物上不溶于水的污渍发挥作用，D错误。故选C。
10．【答案】B
【解析】本实验的自变量是酶的浓度，温度会影响酶的活性，是本实验的无关变量，为排除温度对实验的影响，需保持各组实验温度相同且适宜，A正确；脂肪酶（催化剂）能通过降低活化能，提高化学反应速率，但不能为反应供能，B错误；从图中可知，250mg·100mL−1以后去污效果相同，选用酶浓度为250mg·100mL−1的脂肪酶溶液可节约生产成本，C正确；经纤维素酶洗涤后，棉纤维表面发生脆损，棉织物的耐磨性下降，在外力作用下易使织物表面的纤维脱落从而带走污垢，D正确。
11．【答案】A
【解析】在葡萄酒自然发酵过程中，起主要作用的是野生型酵母菌，起无氧呼吸可以产生酒精，A正确；变酸的酒表面的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，B错误；醋酸菌是需氧生物，C错误；在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，D错误。
12．【答案】B
【解析】须将干酵母活化培养扩增后再进行灭活，以保证酵母菌数量充足，A正确；活酵母能以果汁为原料进行细胞呼吸（无氧呼吸产生酒精），影响果汁品质，B错误；从图中可以看出，失活酵母剂量为16.7g·L−1时去除率达到最大，因此在果汁中添加固定化失活酵母的适宜剂量是16.7g·L−1，C正确；在果汁中直接添加失活酵母，失活酵母及果汁不易分离而难以去除展青霉素，影响果汁品质，D正确。
13．【答案】A
【解析】对培养基灭菌会杀死培养基内外所有的微生物，包括目的菌株，A错误；制作果酒和果醋都应该使用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒，以防止杂菌感染，B正确；发酵液中是否含有酒精可以使用酸性重铬酸钾检测，也可以通过闻或者品尝的方法来检测，C正确；制备固定化酵母时，凝胶珠需在CaCl2溶液中处理一定时间，D正确。
14．【答案】B
【解析】本题考查酸奶制作。抗生素具有杀菌的作用，含抗生素的牛奶不容易发酵，A项错误；乳酸菌发酵过程的酶的活性受温度影响，在最适温度时，制作酸奶需要的时间最短，B项正确；牛奶变酸是因为牛奶中的葡萄糖被乳酸菌利用形成了乳酸，C项错误；消毒灭菌工作应在装瓶前进行，确保乳酸菌活性不受影响，D项错误。
15．【答案】B
【解析】图中①表示物理吸附法，②表示化学结合法，③④表示用包埋材料将酶进行包埋，属于包埋法。
16．【答案】C
【解析】鸡血细胞液中，加入一定量的蒸馏水，有利于瓦解细胞膜，A错误；洋葱鳞片叶碎片中，加入沐浴液和食盐后研磨有利于去除细胞膜，B错误；鱼白（精巢）提取的DNA滤液中，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能破坏蛋白质，加入嫩肉粉有利于去除蛋白质，C正确；DNA溶液中加入冷却的酒精一是抑制DNA水解酶活性，防止DNA降解，二是降低分子运动，易于形成沉淀析出，三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂，D错误。
17．【答案】D
【解析】据图分析，图中①步骤为加入蒸馏水降低氯化钠浓度，析出DNA；②步骤为加冷却酒精使DNA析出；③步骤为加入蒸馏水，使得鸡血细胞破裂，释放核物质；④步骤表示过滤。因此，以上步骤正确的排序为③④①②。
18．【答案】B
【解析】作为萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶。此外，还需要考虑萃取效率、对人的毒性、是否易燃、有机溶剂是否能从产品中完全除去、会不会影响产品质量等问题。
19．【答案】A
【解析】为获得纯净的酵母菌菌种，应对培养液采用高压蒸汽法灭菌，采用干热灭菌会将培养液中水分蒸干，A错误；酵母菌酒精发酵时进行无氧呼吸，其反应式是，B正确；对数生长期时菌群生长繁殖较快，因此对该菌种长久保藏时应选择对数生长期的菌种采用甘油管藏法进行保存，C正确；采用血细胞计数板法统计细胞数时，由于显微镜下分不清细胞死活，会将死亡细胞统计在内，因此所统计的数值较图中实际活菌计数值要高，D正确。
20．【答案】B
【解析】制酸奶要用到乳酸菌，乳酸菌发酵产生乳酸，使得酸奶有一种特殊的酸味，A正确；乳酸菌属于厌氧菌，制作泡菜时要密封，创造无氧环境，利于乳酸菌的繁殖，B错误；根据以上分析可知，由于酵母菌适宜生长的温度是18～25℃，因此制葡萄酒时，要将温度控制在18～25℃，C正确；在变酸的果酒表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，D正确。
21．【答案】C
【解析】氯霉素为抗生素，可抑制细菌的生长和繁殖，A正确；马铃薯含有多种营养成分，可为微生物生长提供无机盐、碳源、氮源等营养成分，B正确；制备该固体培养基的步骤：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板，C错误；对培养菌种计数时，接种方法应为稀释涂布平板法，D正确。
22.【答案】D
【解析】进行分裂的细胞中由于经过了DNA复制，DNA含量相对较多，故蚕豆组织的类型和质量会影响DNA提取的总量，A不符合题意；提取植物组织材料中的DNA时需要加入洗涤剂和食盐，并充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液，由于DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，所以向含DNA的溶液中加入蒸馏水量不同，将影响DNA的提取总量，B不符合题意；玻璃棒搅拌的方向和力度不恰当可能会影响到DNA的断裂，最终影响DNA的提取总量，C不符合题意；加入二苯胺试剂为DNA鉴定环节，不影响DNA的提取总量，D符合题意。
23.【答案】B
【解析】据图分析，②表示出水口，③表示进水口，A错误；收集后的液体是油水混合物，需要加入NaCl增大水的密度，促使水油分离，B正确；本装置为蒸馏装置，C错误；使用该装置时，由于原料在水中，易产生原料焦糊问题，D错误。
24.【答案】D
【解析】根据以上筛选微生物的原则可知，为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，在选择培养基上添加有机磷农药进行选择培养，A正确；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格，B正确；根据以上分析可知，若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目，C正确；制备固体培养基的基本步骤是计算→称量→溶化→分装→加棉塞→包扎→倒平板，因此培养基在灭菌前需要调节pH，D错误。
25.【答案】C
【解析】人工诱变可获得不同类型的突变体，再利用选择培养基从中选取组氨酸依赖型和色氨酸依赖型的菌种，即为M、N菌种，A正确；M、N菌均为有细胞结构的微生物，再由图示流程可知，M、N菌经处理后得到与之前形态不同的原生质体，再用PEG处理，所用M、N菌均有细胞壁结构，B正确；培养基X筛选的菌种是M菌和N菌融合后的细胞，同时含有M、N两种菌的基因，即基因型为A+B+，故培养基X中应不添加组氨酸和色氨酸，C错误；培养基X筛选的菌种是M菌和N菌融合后的细胞，同时含有M、N两种菌的基因，即基因型为A+B+，对组氨酸和色氨酸均不依赖，D正确。
26.【答案】（1）排走冷空气
（2） 发酵过程中葡萄皮的色素进入到发酵液中 两层纱布 增加酒精含量与糖含量
（3） 等体积 不需要 有氧 温度、食盐用量和腌制时间等
【解析】（1）高压蒸汽灭菌锅灭菌，开始加热时要打开排气阀、关闭安全阀，其目的是为了使水沸腾，排出锅内的冷空气，以避免锅内达不到预设的温度或压力。（2）在发酵过程中，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色；发酵完成后，将发酵液用两层纱布过滤，除去葡萄皮和籽；酿果酒时，加蔗糖是为了增加酒精含量和糖含量。（3）显色剂是由10g/L的对氨基苯磺酸和1g/L的N-1-萘基乙二胺盐酸盐等体积混合而成，泡菜打成匀浆前，不需要用清水冲洗，若冲洗会将乳酸菌菌种冲洗掉；乳酸菌是厌氧菌，若泡菜腌制过程中泡菜坛有砂眼，导致氧气含量增加，有氧条件下乳酸菌不发酵，而其他杂菌繁殖后导致蔬菜腐败发臭。泡菜制作过程中要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量。如果温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，亚硝酸盐含量会增加。
27.【答案】（1）富含油脂 选择培养 油脂
（2）稀释涂布平板 菌落周围透明圈的大小
（3）凝胶色谱法 较大 带电性质、分子大小、形状不同
【解析】（1）由于要筛选的是能够产脂肪酶的某种芽孢杆菌，应该采集富含油脂环境的土样，以获得原始菌种；为增加菌种数量可以进行选择培养，且为了增加能够产脂肪酶的某种芽孢杆菌的数量，培养基应中加入一定量的油脂。（2）原始菌株经诱变后，采用稀释涂布平板法将菌液接种在添加了乳化油脂的固体培养基上进行培养可获得单细胞菌落，由于脂肪酶能将白色的乳化油脂分解为甘油和脂肪酸（无色），故通过比较菌落周围透明圈的大小可筛选出脂肪酶高产菌株。（3）脂肪酶的化学本质是蛋白质，实验室常采用凝胶色谱法法分离纯化脂肪酶，此方法分离蛋白质时，分子较大的只能进入孔径较大的凝胶孔隙内，而分子较小的可进入较多的凝胶颗粒内，这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短，分子较小的移动距离较长，故相对分子质量较大的蛋白质先从色谱柱中洗脱出来；还可以采用电泳法，根据脂肪酶和其他蛋白质分子的带电性质、分子大小、形状不同等差异，在电场中产生不同的迁移速度，从而分离脂肪酶。
28.【答案】（1）平板划线法和稀释涂布平板法 伊红美蓝
（2）纤维素酶 采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定
（3）利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层
（4）直接用明火加热容易引起燃烧、爆炸 防止加热时有机溶剂挥发，提高萃取效率
（5）透析 不能
【解析】（1）常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。鉴定大肠杆菌可用伊红美蓝培养基，在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现黑色。（2）筛选分离得到的纤维素分解菌还需要进行发酵产纤维素酶的实验，测定的方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的葡萄糖量进行定量的测定。（3）水蒸气蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。（4）萃取胡萝卜素的装置中，直接用明火加热容易引起燃烧、爆炸，所以采取水浴加热。在加热瓶口安装冷凝装置，可防止加热时有机溶剂挥发，提高萃取效率。（5）从生物材料中得到的蛋白质提取液中往往含有一些无机盐类的小分子，可以用透析的方法去除这些小分子，但该方法不能分离不同的蛋白质。
29.【答案】（1）耐高温菌株
（2）稀释 单菌落 透明圈与菌落的直径
（3）增加培养液溶解氧
（4）提高植酸酶的稳定性 植酸酶的活性和用量 所用的介质
【解析】（1）土壤悬液首先经80℃处理15分钟，目的是使大多数的不耐高温的微生物死亡而筛选出耐高温菌株。（2）土壤悬液在无菌条件下进行梯度稀释，使用稀释涂布平板法接种涂布于含有植酸钠的固体培养基上，经培养后可以观察到单菌落的出现，且出现透明圈，透明圈与菌落的直径比值大小与该菌所产植酸酶数量多少、植酸酶的活性强弱相关。（3）振荡培养的目的是向培养液供氧，同时使微生物与培养液充分接触，有利于微生物的繁殖与生长。（4）常用固定化植酸酶处理饲料，其主要优点有提高植酸酶的稳定性和可连续处理等。在建立和优化固定化植酸酶处理工艺时，除考虑植酸酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有固定化的方法和固定化所用的介质。
30.【答案】（1）多聚半乳糖醛酸酶、果胶酯酶 霉菌、酵母菌
（2）人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长 接种
（3）固定化酶 细胞比酶更容易固定（或：固定化细胞时酶的活性受外界条件影响更小；或：固定化细胞固定的是一系列酶，能催化一系列连续的酶促反应） 无法催化不能被细胞直接吸收的大分子的反应
【解析】（1）果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等，植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶。（2）实验室中筛选微生物的原理是：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。筛选培养时，需要将目的细菌接种到预先配制好的选择培养基中。（3）固定化酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用，因此采用固定化酶的方式来生产果汁，除了能够方便产物与酶的分离、提高产品质量外，还能实现对酶的反复利用，节约生产成本。与固定化酶技术相比，固定化细胞技术的优点是：细胞个大，细胞比酶更容易固定；固定化细胞时酶的活性受外界条件影响更小；固定化细胞固定的是一系列酶，能催化一系列连续的酶促反应。但固定化细胞技术也存在一定的缺陷，如固定化细胞无法催化不能被细胞直接吸收的大分子的反应。