考点53 动物细胞工程-备战2021年高考生物一轮复习考点一遍过 学案

考点53 动物细胞工程
高考频度：★★★☆☆ 难易程度：★★★☆☆

1．动物细胞培养
（1）动物细胞的培养过程

（2）培养条件
①无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，添加抗生素，定期更换培养液以清除代谢产物。
②营养：除正常的有机和无机营养外，需加入血清、血浆等一些天然成分。
③适宜的温度和pH：温度为36.5±0.5_℃(哺乳动物)，pH为7.2～7.4。
④气体环境：含95%空气加5%CO2的混合气体，其中后者的作用是维持培养液的pH。
（3）应用：生物制品的生产、检测有毒物质、医学研究。
2．动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1）动物体细胞核移植技术的过程

（2）原理：动物体细胞核具有全能性。
（3）结果：产生新个体。
（4）应用：①加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；②保护濒危物种；③生产医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植。
3．动物细胞融合
（1）原理：细胞膜的流动性。
（2）融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。
（3）意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径。
4．单克隆抗体
（1）制备过程

（2）优点：特异性强、灵敏度高，可大量制备。
（3）用途：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。


考向一 动物细胞培养与动物体细胞核移植的过程分析

1．对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法错误的是
A．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B．在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分
C．为了防止动物细胞培养过程中的污染，可向培养液中加入适量的抗生素
D．动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸
【答案】D
【解析】在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，以消化组织细胞间的蛋白质，得到单个细胞，A正确；合成培养基的成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常需加入血清、血浆等天然成分，B正确；为了保证细胞处于无菌、无毒的环境，应对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染，C正确；细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，D错误。
解题技巧
动物细胞培养与动物体细胞核移植的比较
项目
动物细胞培养
动物体细胞核移植
原理
细胞增殖
动物细胞核的全能性
过程



结果
获得细胞群

获得与供体遗传物质基本相同的个体

2．在克隆牛的过程中，需要将甲牛的去核卵母细胞与乙牛的体细胞核重组形成重组细胞，将此细胞培养至胚胎发育的早期，然后移入代孕母牛的体内，最后即可得到克隆动物。下列关于克隆动物的叙述，错误的是
A．克隆技术利用了动物细胞核的全能性
B．代孕母牛与所获得的克隆牛之间不存在真正意义上的亲子代关系
C．该过程体现的方法为拯救濒危动物提供了一种新思路
D．核供体相同的克隆动物之间若进行器官移植，则会发生免疫排斥反应
【答案】D
【解析】将动物的体细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物，因此克隆技术利用了动物细胞核的全能性，A正确；由于克隆牛不含有代孕母牛的遗传物质，因此代孕母牛与所获得的克隆牛之间不存在真正意义上的亲子代关系，B正确；该克隆技术能成功培育出克隆动物，因此该过程体现的方法为拯救濒危动物提供了一种新思路，C正确；核供体相同的克隆动物之间若进行器官移植，不会发生免疫排斥反应，D错误。


考向二 单克隆抗体的制备过程分析

3．下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。有关叙述错误的是

A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞
B．②过程体现了细胞膜的流动性
C．③所示细胞因高度分化而失去了分裂能力
D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
【答案】C
【解析】分析图解可知，①表示已免疫的B淋巴细胞，②表示细胞融合，③表示杂交细胞，④表示克隆产生的能产生单一抗体的杂交瘤细胞。①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞，A正确；②是动物细胞融合的过程，该过程利用了细胞膜的流动性，B正确；效应B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，两两融合会有三种结果：杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、B细胞自身融合细胞，其中杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生特异性抗体，C错误；④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群，D正确。
解题技巧
制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的
项目
第一次筛选
第二次筛选
筛选
原因
诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞
由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞
筛选
方法
用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、 “瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)能生长
用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群
筛选
目的
得到杂交瘤细胞
得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞

4．单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：

（1）过程③常用的方法是_________________________。
（2）向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生________免疫。从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是___________________________，细胞Ⅱ应具有的特点是____________________________。
（3）体外培养细胞Ⅱ，首先应保证其处于______________________________的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是______________________。
（4）对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和__________________检测。
（5）若要预防H7N9禽流感，可用图中的______________作为疫苗。
【答案】（1）显微注射技术　（2）体液(只答特异性不可)　 B淋巴细胞(浆细胞或已免疫的B淋巴细胞)　 既能无限增殖，又能产生特异性抗体　
（3）无菌、无毒(缺一不可)　 维持培养液的pH　（4）(专一)抗体 （5）抗原蛋白
【解析】（1）③将重组DNA导入动物细胞，常用显微注射技术。（2）向小鼠体内注射抗原蛋白，使
小鼠产生相应的浆细胞，这是体液免疫，从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是B淋巴细胞(浆细胞或已免疫的B
淋巴细胞)，将无限增殖的基因导入浆细胞，得到的细胞Ⅱ应具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异
性抗体。（3）体外培养细胞Ⅱ，首先应保证其处于无菌、无毒的环境中，其次需要提供充足的营养和
适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是维持培养液的pH。（4）对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行
克隆化培养和检测(专一)抗体。（5）疫苗为毒性弱的抗原，因此要预防H7N9禽流感，可以用图中的抗
原蛋白作为疫苗。

1．日本京都大学探索医疗中心松原弘明教授等人组成的研究小组，从50名患者身上获得了在手术中切除的心脏组织中的一部分，然后利用特殊的酶把细胞逐个分开，进行培养，细胞快速增殖并形成团，他们继续培养，结果细胞变成了心肌、血管和神经。以下说法正确的是
A．心脏组织细胞经人工培养基因发生了变化
B．研究人员对患者的心脏离体细胞至少培养了50代
C．高度分化的心脏细胞分化成多种组织，体现动物细胞具有全能性
D．用来分开心脏细胞的特殊的酶是一种蛋白酶
2．动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。下列从该图提供的信息获得的结论中不正确的是

A．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
B．有无血清对正常细胞与癌细胞培养的影响不同
C．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养
D．培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大
3．实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是

A．甲过程需要在无菌条件下进行
B．乙过程需要将获得的皮肤细胞制成细胞悬液
C．丙过程是原代培养，出现接触抑制现象
D．丁过程是传代培养，细胞不能保持二倍体核型
4．下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，不正确的是
A．制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养
B．给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞
C．需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞
D．利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞
5．利用细胞工程的方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B．体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C．将等量浆细胞和骨髄瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D．利用该单克隆抗体可诊断出SARS病毒的感染者
6．通过细胞工程生产单克降抗体时，通常要经过三次筛选：
①选出能产生抗体的B淋巴细胞
②在特定培养基中筛选杂交瘤细胞
③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。这三个过程的先后顺序是
A．②①③ B．①②③
C．①③② D．③②①
7．下列对动物核移植技术的描述正确的是
A．哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，动物胚胎细胞核移植的难度明显高于体细胞核移植
B．体细胞核移植的过程中可通过基因枪法去除卵母细胞中的核
C．体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞
D．通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制
8．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①、②、③表示其结果，下列说法正确的是

A．若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性
B．c可以表示单克隆抗体的制备，③为获得的单克隆抗体
C．①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
D．若b是试管动物技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
9．如图是克隆羊的培育流程图，下列相关说法错误的是

A．卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到减Ⅰ中期
B．从供体羊中取上皮细胞需要用胰蛋白酶进行处理
C．用微型吸管将卵母细胞的细胞核和第一极体吸出
D．代孕母羊和供体羊需经过同期发情处理
10．下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程。相关叙述正确的是

A．用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞
B．生物反应器内应控制适宜的温度，并冲入纯氧保证细胞呼吸
C．培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长
D．“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重
11．治疗性克隆有望最终解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应。下图表示治疗性克隆的过程，下列有关叙述错误的是

A．上述过程利用了动物细胞移植、动物细胞培养等技术
B．上述过程充分说明动物细胞具有全能性
C．胚胎干细胞具有发育的全能性，可从早期胚胎中分离获取
D．①、②过程都发生DNA复制，转录和翻译
12．某研究者利用细胞工程制备抗A的单克隆抗体。先用抗原(A)分别免疫3只同种小白兔(X、Y和Z)，每只小白兔免疫5次，每次免疫一周后测定各小白兔血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，制备B淋巴细胞时，免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，结果如图所示。下列有关叙述错误的是

A．将抗原A注入小白兔体内的目的是获得已免疫的B淋巴细胞
B．最适合用于制备B淋巴细胞的是第五次免疫后的Y小白兔
C．骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合必须使用灭活的病毒进行促融
D．融合细胞需经两次筛选才可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞
13．关于下面制备单克隆抗体过程示意图的叙述，不正确的是

A．①表示已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的
B．②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导
C．④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的
D．⑤可以无限增殖
14．下图是单克隆抗体制备流程的示意图。下列有关叙述正确的是

A．从小鼠脾脏中获得细胞①主要参与细胞免疫
B．过程②利用细胞膜选择透过性原理
C．细胞③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性
D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
15．甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。相关叙述正确的是

A．过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲
B．过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性
C．过程③、④的筛选方法相同，细胞丙、丁遗传物质相同
D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖
16．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图。相关叙述正确的是

A．①过程所用的促融方法与植物体细胞杂交完全相同
B．③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原进行检测
C．应给小鼠多次注射HCG，以获得较多的记忆细胞
D．④过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒污染
17．如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据图回答：

（1）容器B中用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，是为了______________________________。
（2）培养首先在C瓶中进行，这时的细胞培养称为____________，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为________________。细胞进行有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的____________。为了把C瓶中的细胞分瓶，要用________处理，目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，然后配成________，再分装。
（3）分装后，在D瓶中培养叫做________。一般来说，细胞在传至10~50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，朝着等同于________的方向发展。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为________代以内，以保持______________________________。
（4）细胞培养需满足一定的条件，其中添加抗生素是为了______________，CO2的主要作用是_______。
18．2018年1月25日，由中科院神经科学研究所团队克隆的猕猴“中中”和“华华”，登上了全球顶尖学术期刊《细胞》的封面，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。回答下列问題：
（1）正常情况下，哺乳动物的受精过程主要包括:__________，进入卵细胞膜，原核形成和融合。
（2）哺乳动物的体外受精主要包括________、________等几个主要步骤。
（3）在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有培养法和______________。
（4）在使用合成培养基培养早期胚胎时，通常还需加入_______等天然物质，并需要适时_______，以清除代谢产物，防止代谢产物积累对早期胚胎造成危害。
（5）胚胎在受体内存活的最可能的生理基础是____________________。
（6）克隆猴成功后，人们不得不慎重考虑克隆人的问题，对于此问题，中国政府的态度是_________。
19．如下图所示，请据图回答下面的问题。

（1）淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说细胞膜具有___________________特点。此过程中，常用的生物诱导剂为__________________，该杂交细胞的特点是____________________________________________________。
（2）杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基成分有何主要不同？______________________________________________________________________。
（3）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了__________________________________。
（4）在单克隆抗体制备过程中，应用了细胞工程中的_________________和_______________两大技术。
20．2013年4月16日国家卫生和计划生育委员会公布，全国共报告人感染H7N9禽流感确诊病例77例，其中16人已死亡，禽流感再度备受关注。医学界正在致力于研究预防H7N9禽流感病毒的疫苗和单克隆抗体。科学家决定采用基因敲除术将小鼠的Ig基因敲除，代之以人的Ig基因，然后用H7N9病毒去免疫小鼠，再经杂交瘤技术即可产生大量完全人源化抗体。如图是某科研机构的实验方案。请回答：

（1）此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的__________细胞，经技术处理后的该细胞，再重新植入小鼠脾脏中增殖。
（2）小鼠B淋巴细胞用B表示，小鼠骨髓瘤细胞用A表示，在培养液中，用灭活的动物病毒作促融剂，培养液中共有__________种类型的融合细胞（只考虑两两融合）
（3）第一次筛选是选出____________________型的细胞（用字母组合表示），筛选具体方法是在培养基中加入某种物质，抑制骨髓瘤细胞DNA的复制，而B细胞DNA复制虽不受影响，但增殖能力很有限，只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径，继续增殖。此种培养基称为____________________培养基。
（4）将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，其培养液与植物组织培养的MS培养基相比，特有成分是______________________________。
（5）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了____________________杂交技术。
（6）有人设想，能否利用经H7N9病毒免疫后的小鼠效应T细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，大量生产单克隆干扰素，用于H7N9禽流感患者的有效治疗。你觉得该方法_______________（填“可行”或“不可行”），因为______________________________。

21．（2016·新课标2卷)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。

回答下列问题：
（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为____________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_______的方法。②代表的过程是__________。
（2）经过多次传代后，供体细胞中______的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。
（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是______。
（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________。
22．（2018·江苏卷）如图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是

A．若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再诱导融合
B．a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现
C．c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关
D．c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因
23．（2017·江苏卷）牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是
A．H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌
B．应选用原肠胚做雌雄鉴别
C．鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植
D．用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体
24．（2020年山东省高考生物试卷（新高考)·14）经遗传改造的小鼠胚胎干细胞注入囊胚，通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的实验小鼠。下列说法错误的是（ ）
A．用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子
B．体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理
C．胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植
D．遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得
25．（2020年全国统一高考生物试卷（新课标Ⅰ)·38）为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。

回答下列问题：
（1）上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_________________。
（2）写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：_________________。
（3）为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于_________________，使用该培养基进行细胞培养的结果是_________________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是_________________。
（4）若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有________________（答出2点即可）。

1．【答案】D
【解析】心脏组织细胞经人工培养变成了心肌、血管和神经，属于基因的选择性表达，该过程中基因
未改变，A错误；动物细胞培养一般超过50代，细胞就会发生癌变，因此正常培养不应该超过50代，B
错误；细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。高度分化的心脏细胞分化
成多种组织，而没有发育成完整个体，不能体现动物细胞具有全能性，C错误；在动物细胞培养中，为
了避免细胞的接触抑制，要用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞，D正确。
2．【答案】A
【解析】正常细胞与癌细胞在有血清和无血清时曲线均不重叠，说明正常细胞与癌细胞的增殖速率不
同，A错误；正常细胞在有血清和无血清培养时，同一培养时间下细胞数目不同，说明有无血清对正常
细胞培养的影响不同，B正确；正常细胞与癌细胞在有血清的条件下培养，同一培养时间下细胞数目均
比无血清时多，说明培养基中补充血清有助于正常细胞的培养，C正确；癌细胞在有血清和无血清培养
时，同一培养时间下细胞数目变化趋势一致，说明培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大，D
正确。
3．【答案】D
【解析】分析题图：图示表示小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程，甲表示从实验小鼠获取皮肤
组织，该过程需要对小鼠进行消毒；乙表示用胰蛋白酶将组织细胞分散成单个细胞；丙表示原代培养
过程；丁表示传代培养。离体动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，A正确；动物细胞培养前需用胰蛋
白酶处理皮肤组织使组细胞分散开，制成细胞悬液，B正确；丙表示原代培养，出现接触抑制现象，C
正确；丁是传代培养过程，该过程少部分细胞遗传物质可能发生变化，大部分能保持二倍体核型，D错
误。
4．【答案】D
【解析】制备单克隆抗体过程中先将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，然后筛选出能产生
抗体的杂交瘤细胞进行体内或体外培养，提取单克隆抗体，则运用的技术有动物细胞融合和动物细胞
培养，A正确；给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞，B正确；第二次筛选是从杂交
瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞，再进行体内或体外培养，提取单克隆抗体，C正确；利用生物
导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体的定位导向作用将药物带到癌细胞所在的位置，依靠药物杀死癌
细胞，D错误。
5．【答案】D
【解析】单克隆抗体是由单个的杂交瘤细胞经过增殖而形成的遗传信息相同的大量细胞产生的化学性
质单一、特异性强的抗体，所以用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体不属于单
克隆抗体，A错误；浆细胞不能增殖，体外培养单个浆细胞不能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，
B错误；将等量浆细胞和骨髄瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞中，只有浆细胞和骨髄瘤细胞融合
后形成的细胞才属于杂交瘤细胞，C错误；利用该单克隆抗体能够与抗原特异性结合的原理，可诊断出
SARS病毒的感染者，D正确。
6．【答案】B
【解析】在单克隆抗体的制备过程中，首先利用特定抗原注射动物，然后用专一抗体检验①选出能产
生特定抗体的B淋巴细胞；将该细胞与骨髓瘤细胞进行融合，由于融合和结果有多种（杂交瘤细胞、骨
髓瘤细胞自身融合细胞、B细胞自身融合细胞等），因此需要通过选择培养基②选出杂交瘤细胞；再利
用专一抗体检验③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群，最后对该细胞群进行体内培养或体外
培养获得单克隆抗体，故这三个过程的先后次序是①②③，故选B。
7．【答案】C
【解析】哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于胚胎细胞的全能性高于体细胞，所以动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植，A错误。在体细胞核移植的过程中，去除卵母细胞中的细胞核可采用显微操作去核法，而基因枪法用于基因工程技术，B错误。体细胞核移植过程中通常采用去核的MⅡ期卵母细胞作为受体细胞，C正确。通过体细胞核移植方法生产的克隆动物不是对供体细胞动物进行了100%的复制，因为克隆动物还有一部分遗传物质来自受体的细胞质，D错误。
8．【答案】D
【解析】若a是核移植技术，则①反映了动物体细胞的细胞核具有全能性，A错误；单克隆抗体的制备，需要借助动物细胞培养技术来培养杂交瘤细胞等细胞，但不涉及胚胎移植，因此c不能表示单克隆抗体的制备，B错误；①②③中都需要进行胚胎移植，作为受体的动物品种必须是同种的健康的雌性动物，不一定为珍稀动物，C错误；若b是试管动物技术，借助体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。
9．【答案】A
【解析】从屠宰场收集的卵母细胞需在体外培养到减Ⅱ中期才有受精能力，A错误；从供体羊中取上皮细胞，需要用胰蛋白酶进行处理，使其分散为单个细胞，B正确；核移植过程中，通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体，因此用微型吸管可将卵母细胞的细胞核和第一极体吸出，C正确；在克隆羊的培育过程中，重组胚胎发育到一定阶段，需借助胚胎移植技术，将其移植到同种的、生理状态相同的代孕母羊体内，为了保证移入的胚胎能够存活，代孕母羊和供体羊需经过同期发情处理，D正确。
10．【答案】C
【解析】用胰蛋白酶处理动物组织，可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A错误；动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2，B错误；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上，所以细胞贴附瓶壁的培养瓶或培养皿的内表面光滑，无毒，易于贴附，如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确；理论上来说，仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量，比宰杀1头牛还多100万倍，可有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D错误。
11．【答案】B
【解析】由图可知，该过程涉及许多生物技术，包括动物细胞移植、动物细胞培养等，A正确。细胞全能性指高度分化的细胞离体后能发育成完整的生物个体的潜能，因此上图不能说明细胞具有全能性，B错误。胚胎干细胞在功能上具有全能性，可从早期胚胎或原始性腺中分离获取，C正确。①②过程中伴有细胞分裂和细胞分化过程，细胞分裂间期发生DNA复制和蛋白质合成，为细胞分裂期做准备；细胞分化的实质是基因选择性表达，包括转录和翻译两过程，D正确。
12．【答案】C
【解析】制备抗A的单克隆抗体，必须先获得能产生抗A的B淋巴细胞，则需要将抗原A注入小白兔体内从而获得已免疫的B淋巴细胞，A正确。由于第五次免疫后Y小白兔的血清抗体的效价最高，因此最适合用于制备B淋巴细胞，B正确。骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合可以采用物理法（离心、电激）、化学法（聚乙二醇）或灭活的病毒进行促融，C错误。融合细胞需经两次筛选才可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞，第一次是筛选出杂交瘤细胞(用选择培养基)，第二次是进一步筛选出能产生抗A抗体的杂交瘤细胞，D正确。
13．【答案】A
【解析】已免疫的B淋巴细胞可以从小鼠的脾脏中提取，也可以从血浆中提取，骨髓瘤细胞是从小鼠的骨髓中提取的。单克隆抗体是利用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞得到的，融合方法可以用化学方法——聚乙二醇，生物方法——灭活的病毒等。如果要筛选能产生特定抗体的细胞群，可以通过检测抗原—抗体反应，如果有反应说明产生了抗体。融合细胞具有双亲的特点，既能无限增殖又能产生单一抗体。
14．【答案】D
【解析】①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞，参与体液免疫，A错误；在动物细胞融合的过程中，利用细胞膜的流动性，B错误；效应B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，只考虑两两融合会有三种结果：杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、B细胞自身融合细胞等，只有杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生特异性抗体，C错误；④过程表示用抗体阳性检测，筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D正确。
15．【答案】D
【解析】过程①注射相应抗原后应经过一段时间，使小鼠产生浆细胞，再从小鼠脾脏中提取细胞甲，A项错误；过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的流动性，B项错误；过程③筛选杂交瘤细胞，过程④筛选能产生单一抗体的杂交瘤细胞，二者方法不同，C项错误；过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖，D项正确。
16．【答案】B
【解析】①过程为诱导动物细胞融合，所用的促融方法不同于植物体细胞杂交的是：用灭活的病毒作为诱导剂，A错误；③过程的目的是筛选出能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞，需以抗HCG单克隆抗体为抗原进行检测，B正确；给小鼠注射HCG的目的是获得免疫的B淋巴细胞，C错误；④过程为采用动物细胞培养技术在体外生产抗HCG单克隆抗体，需要添加抗生素等物质，以防止杂菌污染，D错误。
17．【答案】（1）使细胞分散开 （2）原代培养 细胞贴壁 接触抑制 胰蛋白酶 细胞悬液
（3）传代培养 癌细胞 10 细胞正常的二倍体核型（4）防止培养过程中的污染 维持培养液的pH
【解析】（1）动物细胞培养过程中，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块，使细胞分散。（2）在C瓶中进行的是动物组织消化后的初次培养，称为原代培养。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞进行有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。为了把C瓶中的细胞分瓶，要用胰蛋白酶处理，目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，然后配成细胞悬液，再分装。（3）分装后，在D瓶中培养叫做传代培养，传代培养的细胞在传至10~50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，朝着等同于癌细胞的方向发展。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。（4）细胞培养需满足一定的条件，添加抗生素是为了防止培养过程中被杂菌污染；通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
18．【答案】（1）精子穿越放射冠和透明带（2）卵母细胞的采集 精子的获取和受精
（3）化学诱导法 （4）血清(或血浆） 更换培养液
（5）受体子宫基本上不对外来胚胎发生免疫排斥反应 （6）禁止生殖性克隆人，不反对治疗性克隆
【解析】（1）获能后的精子与卵子相遇后，首先发生顶体反应，依靠顶体内的酶先溶解卵丘细胞间的物质，使精子穿越放射冠，然后将透明带溶出一条孔道，使精子穿越透明带，进入卵细胞膜。（2）进行哺乳动物的体外受精，首先需要采集卵母细胞，并培养至减数第二次分裂中期；采集精子，并进行获能处理，然后进行体外受精。（3）对精子进行获能处理的方法有培养法和化学诱导法两种。对于啮齿动物、家兔和猪等动物的精子，一般采用培养法；对牛、羊等家畜的精子常采用化学诱导法。（4）动物细胞培养时，除加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素外，通常还需加入动物血清等天然物质，以满足早期胚胎发育的需要。适时更换培养液，可以清除代谢产物，防止代谢产物积累对早期胚胎造成危害。（5）胚胎在受体内存活的生理基础是受体子宫基本上不对外来胚胎发生免疫排斥反应。（6）目前克隆人技术并不成熟，同时为避免克隆人可能带来的伦理问题，中国政府对克隆人的态度是禁止生殖性克隆人，但不反对治疗性克隆，以让克隆技术最大限度服务于人类医学研究。
19．（1）流动性 聚乙二醇(或灭活病毒) 具有无限增殖能力，能产生特异性抗体
（2）动物细胞培养用的是液体培养基，且其中含有动物血清
（3）抗原与抗体之间结合的高度特异性 （4）动物细胞融合 动物细胞培养
【解析】（1）淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜具有一定的流动性；常用聚乙二醇或灭活病毒作为诱导剂，该杂交细胞的特点是具有无限增殖能力，能产生特异性抗体。（2）动物细胞培养用的是液体培养基，且其中含有动物血清；植物组织培养的培养基是固体培养基，而且含有生长素和细胞分裂素。（3）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了抗原与抗体之间结合的高度特异性。（4）在单克隆抗体制备过程中，应用了细胞工程中的动物细胞融合和动物细胞培养两大技术。
20．【答案】（1）B淋巴 （2）3 （3）AB 选择 （4）动物血清或血浆 （5）抗原—抗体
（6）不可行 骨髓瘤细胞是效应T细胞要攻击杀死的靶细胞，两者不可能融合成杂交瘤细胞
【解析】（1）此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的B淋巴细胞细胞，因为B淋巴细胞可以产生抗体。（2）在诱导细胞融合时，若考虑两两融合，则有AA、BB和AB三类细胞，而在制备单克隆抗体的制备过程中需要异种细胞核融合的细胞，所以需要选择培养基的筛选才能获得所需要的杂交瘤细胞，该细胞既能无限增殖又能产生专一抗体。（3）第一次筛选是选出AB型的细胞（用字母组合表示），筛选具体方法是在培养基中加入某种物质，抑制骨髓瘤细胞DNA的复制，而B细胞DNA复制虽不受影响，但增殖能力很有限，只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径，继续增殖。此种培养基称为选择培养基。（4）将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，其培养液与植物组织培养的MS培养基相比，特有成分是动物血清或血浆。（5）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了抗体—抗原杂交技术。（6）由于骨髓瘤细胞是效应T细胞要攻击杀死的靶细胞，两者不可能融合成杂交瘤细胞，所以不能利用经H7N9病毒免疫后的小鼠效应T细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。
21.【答案】（1）XX或XY 显微操作 胚胎移植 （2）遗传物质
（3）卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响
（4）动物已分化体细胞的细胞核具有全能性。
【解析】（1）提供体细胞的供体可能为雌性，也可能为雄性，因此图中A（正常细胞核）的性染色体组成为XX或XY。常采用显微操作去核法来去除卵母细胞的细胞核。②过程表示将早期胚胎移入受体，即胚胎移植。（2）取供体动物的体细胞培养，一般选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证供体细胞正常的遗传基础。超过10代继续培养，供体细胞中遗传物质（或核型）的稳定性会降低。（3）克隆动物的细胞核基因来自供体，因此大部分性状与供体相同，但细胞质基因来源于受体（或提供卵母细胞的个体），即卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响，这就决定了克隆动物的性状与供体不完全相同。（4）克隆动物的培育采用的是核移植技术，核移植技术的原理是：已经分化的动物体细胞核具有全能性。
22．【答案】BC
【解析】若a细胞和b细胞是植物细胞，应该先用酶解法去掉它们的细胞壁再诱导融合，A错误；无论是动物细胞还是植物细胞，两个细胞的融合都需要促融处理后才能实现，B正确；两个细胞融合成一个细胞，利用了细胞膜的流动性，C正确；c细胞同时具备了a细胞和b细胞中的所有基因，但是基因是选择性表达的，因此c细胞中基因不一定都能够表达，D错误。
23．【答案】D
【解析】单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，A错误；做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，C错误；H-Y抗原免疫母牛，使其体内产生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，D正确。
24.【答案】C
【解析】A、促性腺激素可以使雌鼠超数排卵，获得更多的卵子，A正确；B、精子只有获能后才能完成受精，故体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理，B正确；C、胚胎移植通常选择囊胚期之前的阶段，如桑椹胚或囊胚阶段，C错误；D、转基因技术可以定向改造小鼠的基因，所以遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得，D正确。
25.【答案】（1）诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞
（2）取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液
（3）选择培养基 只有杂交瘤细胞能够生存 抗原与抗体的反应具有特异性
（4）将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养
【解析】（1）实验前给小鼠甲注射病毒A，是为了诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞。
（2）取小鼠的脾脏，剪碎组织，用胰蛋白酶处理获得单个细胞，加入培养液可以制成单细胞悬液。
（3）图中筛选1需要用到选择培养基，只有杂交瘤细胞可以存活。筛选2是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，该过程要用到抗原抗体杂交，故筛选所依据的原理是抗原-抗体反应具有特异性。
（4）获得能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞后，可以在体外培养液中进行培养，或在小鼠的腹腔中进行培养，使杂交瘤细胞大量增殖。