高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》专题1 传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋的制作课文内容课件ppt
展开脲或称尿素,是蛋白质降解的产物。人和其它哺乳动物的尿中都含有尿素,有一些细菌含有脲酶,它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。选择以尿素作为唯一氮源即可分离出此类微生物。
制备LB完全营养培养基和尿素为N源的培养基,分别培养土壤中的微生物。在完全营养培养基上菌落多,在尿素为N源培养基上只能生长少数的菌落,即能利用尿素的细菌。
1、250mL的三角瓶2个2、有盖试管5支(15mm×150mm)、试管架3、培养皿4个4、超净台5、移液器6、玻璃刮刀7、酒精灯8、200mL烧杯1个
1、制备培养基:在60℃左右时,将两只三角瓶中已灭菌的LB固体培养基和尿素固体培养基,在酒精灯旁分别倒入两个培养皿中,在水平的超净台上摇匀,平放至凝固
2、制备细菌悬液。在无菌条件下,将1g土样加到有99mL无菌水的三角瓶中,振荡10min,即成10-2土壤稀释液。依此法制备10-3、10-4和10-5的土壤稀释液。
3、用涂布分离法分离细菌。取10-4和10-5土壤稀释液各0.1mL,分别加入到LB培养基和尿素培养基中,用玻璃刮刀将菌液涂布到整个平面上
4、培养细菌。将培养甲倒置,在37度恒温箱中培养24—48h,观察菌落数5、观察。全营养培养基中菌落较多,尿素培养基只有少量菌落。
1、为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基?答:琼脂是未被纯化的混合物,内含一定的含N化合物,用琼脂糖替代琼脂后,微生物只能以尿素为唯一N源,利于对细菌的筛选。
有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用?此类细菌使废弃物降解形成氨后将其利用,防止尿素在自然情况下高温水解形成氨,并进一步形成一些化合物,使土壤板结
3、有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现?此细菌能分解尿素产生氨,氨为碱性,酚红指示剂在碱性下为红色,标志着存在脲酶水解尿素的作用,红色区域大小代表脲酶活性强弱和含量的多少。
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