高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题1 DNA的粗提取与鉴定当堂检测题
展开一、选择题
1.DNA在下列哪一个温度下会变性?( )
A.20 ℃ B.40 ℃C.60 ℃ D.100 ℃
2.向溶有DNA的2 ml·L-1 NaCl溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是( )。
A.减小;减小 B.增大;增大C.先减小后增大;增大 D.减小;增大
3.破译基因组成的遗传信息,首先要提取DNA,下列不适于作为DNA提取的实验材料的是( )。
A.鸡血细胞 B.蛙的红细胞C.人的成熟红细胞 D.菜花
4.去除DNA杂质时,可直接在滤液中加入________,反应10~15 min( )。
A.嫩肉粉 B.蒸馏水C.2 ml·L-1 NaCl D.酒精
5.玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)显现的颜色分别是( )。
A.黄色、紫色 B.白色、砖红色C.白色、蓝色 D.蓝色、砖红色
6.在DNA的粗提取实验过程中,对DNA提取量影响相对较小的是( )。
A.使血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA等物质
B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在析出DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸馏水,直到黏稠物不再增多
D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至再将混合物放入冰箱中冷却
7.在DNA的粗提取实验过程中,有两次DNA沉淀析出,其依据的原理是( )。
①DNA在物质的量浓度为0.14 ml·L-1的NaCl溶液中溶解度最低 ②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出
A.两次都是①B.两次都是②
C.第一次是①,第二次是②D.第一次是②,第二次是①
8.下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述,正确的是( )。
A.该实验先后两次加入的蒸馏水其作用完全相同
B.质量浓度为0.1 g·mL-1的柠檬酸钠溶液具有促凝血作用
C.利用DNA不溶于酒精而蛋白质能溶于酒精的性质,可将DNA与蛋白质分离
D.在溶有DNA的2 ml·L-1的NaCl溶液中缓缓加入蒸馏水,搅拌后取滤液再进行实验
9.以下叙述不正确的是( )。
A.嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能水解蛋白质
B.通过比色法来检测亚硝酸盐含量需要配制标准显色液
C.利用DNA和蛋白质在不同浓度NaCl中溶解度不同粗提DNA
D.在以尿素为唯一氮源的培养基中生长的细菌均为只能利用尿素的细菌
10.将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14 ml·L-1 NaCl溶液、2 ml·L-1 NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中,然后用放有纱布的漏斗过滤,分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r,其中由于含DNA少可以丢弃的是( )。
A.P、Q、R B.p、q、rC.P、q、R D.p、Q、r
二、非选择题
11.利用DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,可以从生物组织中提取DNA。下面是有关DNA提取鉴定实验中的有关问题。
(1)下图是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线。在NaCl溶液浓度低于0.14 ml·L-1时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而________;在0.14 ml·L-1时,DNA的溶解度________;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA溶解度又________。
(2)为了纯化提取的DNA,需要将获取的含DNA的滤液做进一步处理。下面是去除杂质的三个方案。
方案一:在滤液中加入浓度为2 ml·L-1的NaCl溶液,过滤除去不溶的杂质,再调节NaCl溶液浓度为0.14 ml·L-1,析出DNA。
方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10~15 min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
方案三:将滤液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中,保温10~15 min。
三个方案所利用的原理分别是什么?
方案一:___________________________________________________________________。
方案二:___________________________________________________________________。
方案三:___________________________________________________________________。
(3)将上述处理液过滤,加入与滤液体积相等的体积分数为95%的冷却的酒精,搅拌后溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA,将丝状物放入试管,加入2 ml·L-1的NaCl溶液5 mL,再加入4 mL二苯胺试剂,在________的条件下,DNA会被染成________色,如果将白色丝状物置于载玻片上,滴加几滴甲基绿染液,DNA将呈现________色。
12.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验材料的选择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血作实验材料的原因是什么?请据图回答问题。
(1)鸡血细胞中红细胞含__________,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中__________细胞数目较多,可以提供丰富的__________。
(2)实验前由老师制备血细胞液供同学们作实验材料,而不用鸡全血,主要原因是________________________________________________________________________。
(3)生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若他们按实验要求完成实验步骤后,结果是__________________________,这是因为这些动物和人类一样,成熟的红细胞中__________,但若改用动物肝脏作实验材料,实验能顺利进行,这是因为_______________________________________________________________________________。
(4)若选用动物肝脏作实验材料,在提取之前,最好增加__________程序,使组织细胞更易分离。
13.实验中对DNA进行鉴定时,做如下操作:
(1)完成表格空白处的实验内容。
(2)对B试管,完成1、2、3的操作后溶液颜色如何?______________________。
(3)在沸水中加热的目的是____________________,同时说明DNA对高温有较强的________________________________________________________________________。
(4)A试管在实验中的作用是__________。
(5)B试管中溶液颜色的变化程度主要与________________________有关。
参考答案
1. 答案:D 大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温,而DNA在80 ℃以上时才会变性。
2. 答案:C
3. 答案:C DNA主要分布于细胞核中。哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核。
4. 答案:A 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
5. 答案:C DNA在体积分数为95%的冷酒精中析出时的颜色为白色,DNA遇二苯胺(沸水浴)显现的颜色为蓝色。
6. 答案:B A项的做法是为了充分释放出核中的DNA分子,使进入滤液中的DNA量尽量得多;C项是让DNA充分沉淀,保证DNA的量;D项的道理同C项。而B项的操作并不能使DNA增多或减少。
7. 答案:C 第一次沉淀析出是用浓NaCl溶液溶解核内DNA之后,加蒸馏水稀释NaCl溶液至0.14 ml·L-1,使DNA溶解度最低而析出;第二次沉淀析出是用冷酒精溶液使DNA凝集并溶解非DNA物质,达到提纯DNA的目的。
8. 答案:C 该实验中第一次加蒸馏水的目的是使红细胞破裂,第二次加蒸馏水的目的是使NaCl溶液浓度降低,使DNA析出;0.1 g·mL-1的柠檬酸钠溶液有抗凝血作用;在溶有DNA的2 ml·L-1的NaCl溶液中加入蒸馏水,搅拌后会析出DNA,此时应弃去滤液,再进行实验。
9. 答案:D 能在以尿素为唯一氮源的培养基中生长的细菌,除了存在能分解尿素的细菌外,还可能有自生固氮菌,后者也不需要在培养基中添加氮源。
10. 答案:C 将粗提取的DNA丝状物加入0.14 ml·L-1 NaCl溶液中,DNA析出,过滤后存在于纱布上(p),杂质存在于滤液中(P);加入2 ml·L-1 NaCl溶液中,DNA溶解,过滤后存在于滤液中(Q),杂质存在于纱布上(q);加入体积分数为95%的酒精溶液中,DNA析出,过滤后存在于纱布上(r),杂质存在于滤液中(R)。
11. 答案:(1)逐渐降低 最低 逐渐增大 (2)利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质 利用蛋白酶分解杂质蛋白质,从而使DNA与蛋白质分开 利用DNA与蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性与DNA分离 (3)沸水浴 蓝 绿
12. 解析:(1)鸡红细胞含有细胞核,因其属于鸟类,新陈代谢旺盛,需要红细胞为其供应O2,所以红细胞数目较多,可以提供丰富的DNA。(2)鸡的全血包括血浆和血细胞,血浆中无DNA,全血中除去血浆后即是浓缩的血细胞液,DNA的相对含量提高了。(3)牛、羊、马同人类一样,均属于哺乳动物,而哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核,仅靠血液中的白细胞和淋巴细胞中的少数DNA,在实验中很难提取到白色丝状物(DNA),肝细胞中含有细胞核,只要操作准确,就能提取到DNA。(4)肝脏是一个器官,组织细胞连在一起,若使其组织分离,可将肝脏剪碎,研磨。
答案:(1)细胞核 红 DNA (2)鸡血细胞液中DNA相对含量高 (3)很难提取到DNA 无细胞核 肝细胞有细胞核 (4)研磨
13. 解析:本题主要考查DNA分子的鉴定。A、B两试管形成对照,B试管中含DNA丝状物,A试管中不含,起对照作用,其他条件均完全相同。本实验强调反应条件是沸水浴加热5 min,加快颜色反应的速度,观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。
答案:(1)实验现象:A.溶液不变蓝色 B.溶液逐渐变蓝色 实验结论:DNA在沸水浴的情况下遇二苯胺会被染成蓝色 (2)溶液颜色基本不变(不呈浅蓝色) (3)加快颜色反应速度 耐受性 (4)对照 (5)加入试管中的DNA(丝状物)的多少
试管
序号
A
B
1
加2 ml·L-1 NaCl溶液5 mL
加2 ml·L-1 NaCl溶液5 mL
2
不加
加入提取的DNA丝状物并搅拌
3
加4 mL二苯胺,混匀
加4 mL二苯胺,混匀
4
沸水浴5 min
沸水浴5 min
实验现象
实验结论
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